فهرست مطالب

Genetics in the Third Millennium
Volume:12 Issue: 1, 2014

  • تاریخ انتشار: 1393/03/31
  • تعداد عناوین: 11
|
  • مونا پاکدل، محبوبه ضرابی، عزت عسگرانی، پریسا محمدی*، مریم رودباری، مریم یوسفی صفحات 3378-3385

    کاندیدا آلبیکنس به صورت بیوفیلم، به عنوان یکی از مهمترین پاتوژن های قارچی انسان شناخته شده است و بیشتر مطالعات مولکولی بر ژن های عامل تشکیل بیوفیلم در این گونه مخمری صورت گرفته است. عفونت واژینال از جمله شایع ترین عفونت ها در میان زنان است. چنین به نظر می رسد که دو ژن als1 و hwp1 نقش مهمی در ایجاد بیوفیلم این گونه قارچی داشته باشند. هدف از این پژوهش، بررسی مقایسه ای دو ژن als1 و hwp1 جدایه های کاندیدا آلبیکنس از بیماران مبتلا به عفونت های واژینال بوده است.. در این مطالعه 7 جدایه به دست آمده از زنان مبتلا به عفونت واژینال از مراکز مختلف پزشکی تهران در سال های 1390 و 1391 انتخاب شد. استخراج DNA به روش فنل - کلروفرم - ایزوآمیل الکل صورت گرفت. سپس Multiplex PCR با پرایمرهای اختصاصی انجام شد. نتایج حاصل حضور دو ژن als1 و hwp1 را به ترتیب با فراوانی 57% و 28% در جدایه های مورد مطالعه نشان داد. نتایج این مطالعه دلالت بر این دارد که 50% از جدایه های واجد ژن als1 دارای ژن hwp1 نیز می باشند. به منظور تشخیص عفونت های واژینال، حضور دو ژن als1 و hwp1، می تواند ضروری بوده و مورد بررسی قرار گیرد.

    کلیدواژگان: کاندیدا آلبیکنس، بیوفیلم، عفونت واژینال، Multiplex PCR
  • رضا طالبی، احمد احمدی، فضل الله افراز، سید ضیاءالدین میرحسینی صفحات 3386-3399
    در مقاله حاضر با توجه به استعداد پایین شتر در ابتلاء به فشار خون و مقاومت بالا در برابر سموم محیطی، برخی ژن ها از قبیل ژن های خانواده سیتوکروم P-450 که مسئول این ویژگی های منحصر به فرد در شتر هستند با توالی ژن های انسان مقایسه شدند. توالی ژنومی از پایگاه های داده بیوتکنولوژی بدست آمد. آنالیز بیوانفورماتیک به وسیله نرم افزارهای مجموعه Laser gene، Bio edit، Mega و BlastP انجام شد. نتایج هم ترازی چندگانه نشان داد اسیدهای آمینه Thr، Pro و Phe در تمامی ایزوفرم ها کاملا حفظ شده است. بیشترین فراوانی اسید آمینه برای توالی توافقی به اسیدهای آمینه Pro، Gly و Phe تعلق داشت. تغییر آمینو اسیدی در ایزوفرم های یکسان بین شتر و انسان کاملا مشهود بود که می تواند ناشی از جهش باشد، مثلا اسیدهای آمینه Ala، Val و Ser در بخشی از ایزوفرم CYP2W1 انسان به ترتیب به وسیله Val، Leu و Thr در شتر جایگزین شده است. pH ایزوالکتریک ایزوفرم های شتر بیشترین (6/9 برای CYP2E1) و در انسان کمترین (1/8 برای CYP2E1) محاسبه شد. نتایج درخت تکامل بر اساس حداکثر درست نمایی نشان داد برخی ایزوفرم های شتر با انسان در یک زیر خوشه جای دارد (CYP2C9، CYP2W1 و CYP1A1 انسان به ترتیب با CYP2C92، CYP2W1 و CYP1A1 شتر). نتایج همسانی ژنومی و شاخص E-value نشان داد بالاترین درصد همسانی (83 درصد) به CYP2W1 بین شتر و انسان تعلق داشت، همسانی ژنومی بین CYP2E1 شتر با گاو (76 درصد) بیشتر از همسانی ژنومی بین CYP2E1 شتر با انسان (68 درصد) محاسبه شد. در ضمن ژنوم گاو ایزوفرم CYP2E1 شتر را به طور کامل پوشش داد. در نهایت، تحقیق حاضر تولید داروهای سنتتیک و تحریک جهش های موثر بر اساس ساختار پلی پپتیدی CYPهای شتر را راهی ارزشمند در جهت بالا بردن مقاومت انسانی به فشار خون و سموم محیطی می داند.
    کلیدواژگان: فشار خون، سیتوکروم P، 450، توالی حفظ شده، توالی توافقی، همسانی توالی
  • مریم جمشیدی فر، سید حمید زرکش اصفهانی، کامران قائدی صفحات 3400-3409
    آنتی بادی ها ابزارهای قدرتمندی برای مطالعه ی عملکرد، مکان یابی و میان کنش پروتئین ها هستند. هم چنین این مولکولها به طور گسترده برای اهداف تشخیصی و درمانی نیز به کار می روند.آنتی بادی ها معمولا برای اهداف تحقیقاتی و تشخیصی با مولکولهای فلورسنت نشاندار می گردند. اگر مولکول فلورسنت مورد نظر یک پروتئین نوترکیب باشد در این حالت مولکول حاصله فلوبادی نامیده میشود. در مطالعه حاضر، قطعه تک زنجیرهای ناحیه متغیر یک آنتی بادی بر ضد گیرنده CD4 انسانی که به پروتئین فلورسنت سبز متصل شده است، توسط دو آنزیم IEcoR و NcoI از پلاسمید IpAB استخراج گردید. سپس قطعه مورد نظر به منظور افزایش بیان پروتئین در پلاسمید pET26b کلون شده و پلاسمید نوترکیب ایجاد شده در باکتری اشرشیا کلی ترانسفورم گردید. ورود قطعه مذکور به داخل پلاسمید pET26b به وسیله واکنش کلنی-PCR و هضم دوگانه تایید شد. هم چنین بیان فلوبادی نیز توسط روش دات بلات تایید گردید. فلوبادی نوترکیب حاضر یک آنتی بادی با عملکرد دوگانه بوده که به طور همزمان ویژگی اتصال به آنتی ژن و فلورسنت خود را حفظ کرده است. بنابراین انتخاب پلاسمید مناسب مانند pET26b برای تولید مقادیر زیاد این فلوبادی برای اهداف ما ضروری به نظر می رسد.
    کلیدواژگان: آنتی بادی، فلورسنت، پلاسمید، پروتئین، اشرشیاکلی
  • مونا خلقی، جلال رستم زاده، فرید حیدری، محمد رزم کبیر صفحه 3410
    مباحث مولکولی از اهمیت روز افزونی در بررسی های علوم زیستی برخوردار است که استخراج اسیدهای نوکلیک(DNA و RNA) اولین گام در این بررسی ها می باشد. لذا استفاده از یک روش استخراج DNA که سریع، بی خطر، مقرون به صرفه و دارای کمیت و کیفیت مطلوبی باشد، همیشه مورد نیازاست. چندین روش مختلف به منظور حداقل کردن مراحل استخراج DNA توسط محققان مختلف گزارش شده که نتایجمطالعات اخیرنشانمی دهد،باتوجهبههدفو کاربردیکهازاستخراج DNAمدنظر است، روش مطلوب استخراج DNA می بایست انتخاب شود.هدف از این تحقیق مقایسه کمیت و کیفیت DNAبا دو روش نمکی و روش فنل-کلروفرم می باشد در این تحقیق از 80 نمونه اسپرم گاوهلشتاین استفاده گردید.بعد از استخراج DNA،به منظور تعیین کمیت و کیفیت DNA استخراج شده،ازدستگاه نانودراپ و ژل آگارز استفاده شد. میانگین حداقل مربعات کمیت و کیفیت DNA استخراج شده با روش استخراج نمکی به ترتیب 88/114±27/813 (نانوگرم درمیکرولیتر) و 013/0±86/1 و با روش فنل-کلروفرم به ترتیب 16/23±31/175 (نانوگرم درمیکرولیتر) و 022/0±57/1 بود. همچنین نتایج الکتروفورز فقدان شکستگی در نمونه های DNA را نشان داد. مطالعه حاضرنشان می دهد که استخراج DNA از اسپرم با روش نمکی نتایج مطلوبتری نسبت به روش فنل-کلروفرم داشت لذا به نظر می رسد این روش برای استخراج DNA از نمونه های اسپرم در آزمایشگاه های مولکولی مناسب تر باشد.
    کلیدواژگان: استخراج DNA، روش نمکی، روش فنل، کلروفورم، گاو هلشتاین
  • ندا خازنی اسکویی، عاطفه اسماعیل نژاد، غلامرضا نیکبخت بروجنی*، بهروز اسدی صفحات 3420-3427

    مطالعات ژنتیک ملکولی تاثیر بسزایی بر دانش ما از روند های تکاملی و بوم شناختی موجودات، آنالیز ژنتیک جمعیت ها و ارتباطات فیلوژنتیک آن ها دارد. استفاده از تخم به عنوان منبع ماده ژنتیکی یکی از روش های غیر تهاجمی نمونه گیری بوده و در طیف وسیعی از گونه های تخم گذار کاربردی است. هدف از مطالعه حاضر معرفی یک روش مناسب برای استخراج DNA مادری (از پوسته) و جنینی (از بلاستودرم) از یک تخم مرغ است. 150 نمونه شامل 70 نمونه پوسته، 70 نمونه بلاستودرم و 10 نمونه خون مربوط به طیور لگهورن بررسی شد. کارایی فرایند استخراج DNA با استفاده از مارکر ریز ماهواره LEI0258 مورد ارزیابی قرار گرفت. این ریزماهواره جهت تایپینگ MHC به کار میرود. علاوه بر این، برای بررسی تطابق DNA استخراج شده از پوسته با DNA مادری، ژنوتیپ های بدست آمده از نمونه های خون مادر و پوسته تخم مرغ ها با یکدیگر مقایسه شدند. DNA جنینی از تمامی نمونه های بلاستودرم و DNA مادری در 78% پوسته ها با موفقیت جدا شد. ما توانستیم تا روز 3 انکوباسیون DNA مادری و جنینی را به طور جداگانه از یک تخم مرغ استخراج کنیم. در روزهای بعد DNA مادری موجود در پوسته به DNA جنینی آلوده شده بود. نتایج این تحقیق نشان می دهد که روش استخراج از یک تخم مرغ می تواند بطور موفقیت آمیزی برای بدست آوردن ماده ژنتیک مادر و جنین در طیور استفاده شود.

    کلیدواژگان: استخراج DNA، DNA مادری و جنینی، پوسته تخم مرغ، بلاستودرم
  • مجاهد کمالی زاده، محمدرضا بی همتا، سیدعلی پیغمبری، جواد هادیان صفحات 3428-3437
    به منظور بررسی تاثیر اسپری نانوذره دی اکسید تیتانیوم (TiO2) بر میزان بیان سه ژن RAS1، PAL2 وTAT3 دخیل در مسیر بیوسنتزی رزمارینیک اسید در گیاه دارویی بادرشبو (Dracocephalum moldavica L.)، این نانوذره در پنج غلظت مختلف (0، 10، 20، 30 و 50 پی پی ام) در قالب طرح کاملا تصادفی با سه تکرار با شروع مرحله گلدهی برروی گیاهان بادرشبو توده ارومیه کشت شده در گلخانه دانشکده کشاورزی دانشگاه تهران، اسپری شد. 24 ساعت بعد از اعمال تیمارها، نمونه برگی از تیمارهای مختلف گرفته شد و در فریز 80- درجه سانتی گراد نگهداری شدند. در مرحله گلدهی کامل، اندام های هوایی گیاهان برداشت و به مدت یک هفته در سایه خشک شدند. برای شناسایی و تعیین درصد رزمارینیک اسید عصاره، از دستگاه کروماتوگرافی مایع با کارآ یی بالا استفاده شد. سپس داده ها با استفاده از نرم افزار SAS مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند. نتایج نشان داد بین سطوح مختلف نانوذره در میزان تولید رزمارینیک اسید در سطح یک درصد از نظر آماری تفاوت معنی دار وجود دارد. میزان تولید رزمارینیک اسید در غلظت های کم نانوذره تا تیمار 30 پی پی ام افزایش داشت و به 16.78 میلی گرم در گرم عصاره رسید و در غلظت های بالاتر روند کاهشی داشت. جهت بررسی الگوی بیان ژن ها از روش واکنش زنجیره ای پلی مراز در زمان واقعی استفاده شد. بیان نسبی ژن RAS و PAL دارای الگوی تقریبا مشابه هستند. هرچند میزان بیان ژن RAS به مراتب بیشتر است. در تیمار 30 پی پی ام، بیان ژن RAS بسیار بالا و چشمگیر بود. بیان ژن TAT از الگوی خاص پیروی نمی کند و در تیمارهای مختلف این تحقیق بیان نسبی نداشته است. این تحقیق نشان داد که استفاده از این نانوذره تا غلظت 30 پی پی ام، باعث افزایش میزان رزمارینیک اسید و نیز افزایش بیان ژن های درگیر در مسیر بیوسنتزی این ترکیب به خصوص رزمارینیک اسید سنتتاز در گیاه بادرشبو، شد.
    کلیدواژگان: بیان ژن، نانوذره دی اکسیدتیتانیوم، رزمارینیک اسید، بادرشبو
  • سمیرا نگاهداری، اعظم راستی، محمدرضا دهقانی *، علی محمد فروغمند، فاطمه منتظری، حمیدرضا قدیمی صفحات 3438-3448

    غیر فعال شدن کروموزوم X، فرایند اپی ژنتیکی است که طی آن یکی از کروموزوم های X در پستانداران ماده برای حفظ تعادل ژنی میان جنس نر و ماده غیرفعال می شود. پس ازآن، تمامی زاده هاییک سلول، Xغیرفعال یکسانی دارند که نتیجه آن تولید موزائیکی از سلول هاست که در یکسری X پدری و در سری دیگر Xمادری غیرفعال است. این موزائیسم سلولی مزایایی را برای زنان به همراه دارد، چراکه به علت تنوع قابل توجه ژنوم انسان اگر جهشی در کروموزوم X مادری وجود داشته باشد، به احتمال بسیار کمی در کروموزوم X پدری نیز وجود دارد. در این زنان در پی فرایند غیر فعالسازی در نیمی از سلول ها X مادری غیر فعال شده، بنابراین تنها در نیمی از سلول ها جهش وجود دارد. درصورتیکه، در 100درصد سلول های یک مرد به علت همی زیگوت بودن، جهش وجود دارد. الگوی غیرفعال شدن کروموزوم X تقریبا بصورت نرمال است. 10 تا 20 درصد زنان، انحراف از الگوی غیرفعال شدن را نشان می دهند. این انحراف در زنان حامل بیماری های عصبی از قبیل سندرم رت، اوتیسم، عقب ماندگی های وابسته به X، آدرنولوکودیستروفی و...دیده شده است. در این مقاله در مورد اثر انحراف از الگوی غیر فعال شدن کروموزوم X در بیماری های عصبی و اثراتی که اختلال در آن به جا می گذارد، صحبت شده است.

    کلیدواژگان: غیر فعال شدن کروموزوم X، اوتیسم، سندرم رت، اختلالات سیستم عصبی
  • محمد امین هنردوست، حمزه مصریان تنها، مسعود اعتمادی فر، سهیلا رهگذر، منصور صالحی، کامران قائدی صفحات 3448-3469
    مولتیپل اسکلروزیس(MS) بیماری مزمن التهابی و تخریب کننده ی میلین است که سیستم عصبی مرکزی شامل مغز و نخاع را درگیر می کند. miRNA گروه جدیدی از مولکول های RNA کوچک و غیر کدکننده هستند که در تنظیم بیان ژن در سطح پس از رونویسی نقش دارند. نقش miRNA در تنظیم فرآیندهای بیولوژیک مختلف از قبیل رشد، سیکل سلولی، نمو، تمایز، متابولیسم و آپوپتوز مشخص شده است. مطالعات پروفایلینگ بیان miRNA نشان می دهند برخی miRNA ها (مثل miR-155 و یا miR-326)، در سلولهای خونی و یا پلاک های مغزی بیماران مبتلا به MS در مقایسه با افراد سالم، تغییر بیان نشان می دهند؛ به علاوه مشخص شده است حذف این miRNA ها در مدل های حیوانی بیماری MS، موجب تغییر در شدت علائم کلینیکی می شود. از این رو به نظر می رسد miRNA نقش مهمی در پاتولوژی و بیماری زایی بیماری MS داشته باشد. ما در این مقاله ی مروری ابتدا به طور خلاصه نحوه ی بیوژنز و مکانیسم عمل miRNA را توضیح داده و سپس به مرور و بررسی جدید ترین مطالعات صورت گرفته پیرامون پروفایل بیان miRNA در بیماران مبتلا به MS، اهداف احتمالی MiRNA و ارتباط آنها با مکانیسم های بیماری زایی در بیماری MS، پرداخته ایم.
    کلیدواژگان: مولتیپل اسکلروزیس، microRNA، پروفایلینگ بیان ژن، سیستم ایمنی، بیماری خودایمن
  • ساجده سعیدی، محمد علی جلالی فر، محمد پدرام، نجم الدین ساکی صفحه 3470
    آنمی داسی شکل نوعی بیماری ارثی اتوزومی مغلوب است، که در نتیجه جابجایی گلوتامیک اسید با والین در کدون شماره 6 در زنجیره بتاگلوبین اتفاق می افتد که موجب تغییر شکل گلبول قرمز می شود. پنج جهش مختلف درهاپلوتیپ های βs دیده شده است که شامل Benin، Senegal، Bantu، Cameroon و Arab_Indian هستند. ارتباط نزدیکی بین شیوع HbS ومناطق اندمیک مالاریا دیده شده است. شیوع صفت داسی شکل وآنمی داسی (SCD) در جنوب ایران به ترتیب حدود 43/1% و 1/0% تخمین زده شده است. شیوع SCD در مرکز ایران 8% است. بیشترین شیوع بیماری در جنوب ایران (اهواز) گزارش شده است که مربوط به هاپلوتیپ عرب-هندی است. در همراهی صفت داسی با آلفا تالاسمی کاهش تجمع HbS در داخل گلبول قرمز موجب می شود آنمی همولیتیک بروز نکند. جنوب مرکزی ایران(کرمان) شیوع همراهی آلفا تالاسمی و HbS 5/57% است.
    کلیدواژگان: بیماری های آنمی داسی شکل، انواع هاپلوتیپ ها، فراوانی، همراهی با دیگر بیماری ها، ایران
  • علی حسینی برشنه، آریانه صدر نبوی * صفحات 3478-3487

    بیماری های ژنتیکی از دیربازعامل بخش قابل توجهی از بیماری ها و مرگ ومیر بشر بوده و درطی چند دهه اخیر و با تکمیل پروژه ژنوم انسان حجم عظیمی ازاطلاعت ژنوم مهیا گشته وتشخیص ودرمان بیماری های ژنتیکی راعملی کرده است. متناسب با این دستاوردها مسائل اخلاقی ومجهولاتی درخصوص نحوه استفاده ازاین منبع عظیم پیش خواهدآمد که نحوه پاسخ به آن آینده بشریت را تهدید می کند. این مقاله مروری با بهره گیری از منابع معتبر ژنتیک پزشکی، بی طرفانه و بدون اعمال عقاید شخصی به بحث و چالش در خصوص دستاوردهای تشخیص ژنتیکی بیماری ها، مسائل اخلاقی و تنگناه های بوجود آمده و بررسی راهکارهای موجود می پردازد. معیارهایی توسط صاحب نظران حیطه ژنتیک پزشکی در خصوص رویارویی با مسائل اخلاقی ارائه شده و الگوی عملکردی و رفتاری در مشاوره ژنتیک، تشخیص، درمان و نحوه مدیریت بیماری های ژنتیکی قرار گرفته است. مهمترین این اصول شامل اولویت های بیمار، منفعت بیمار، خود مختاری، انتخاب آگاهانه، کسب رضایت آگاهانه، رازداری و رعایت عدالت می باشد. نقض و هر گونه تحریف در این موارد مشکلات و ضررهای غیر قابل جبرانی را برای بیمار در پی دارد، از جمله موارد می توان به تشخیص قبل از تولد و تنگناهای اخلاقی، موارد مجاز سقط جنین، درگیر شدن افراد دیگر خانواده، ژنتیک و بیمه، غربالگری بیماری های ژنتیکی و حقوق اجتماعی اشاره کرد که تحریف در هر مورد تجاوز به حقوق بیمار است. نحوه پاسخ به این مسائل در چارچوب اصول اخلاقی ژنتیک پزشکی متکی به موقعیت فرهنگی، مذهبی و اجتماعی جوامع مختلف است. اعضای جامعه ژنتیک پزشکی نقش کلیدی در متعادل کردن نیازهای جامعه دارند و با کمک و همکاری علوم وابسته می توانند با عملکرد صحیح باعث پیشبرد روش های تشخیصی و درمانی و بستر سازی امنیت بیماران در خصوص صیانت از تست های ژنتیکی و اطلاعات پزشکی آنان فراهم سازند.

    کلیدواژگان: اخلاق، تشخیص، ژنتیک، پزشکی
  • محمدحسن کریمی نژاد صفحات 3488-3497
|
  • Mona Pakdel, Mahbobe Zarrabi, Ezat Asgarani, Parisa Mohamadi*, Maryam Roudbary, Maryam Usefi Pages 3378-3385

    Candida albicans، in the form of biofilm، is known as one of the most important human fungal pathogens and most studies are carried out on the genes responsible for biofilm formation in this fungal species. Vaginal infection is the most common infection among women. Evidences suggest that als1 and hwp1 genes play important roles in this type of infection، so the aim of this study was to evaluate als1 and hwp1 genes in Candida albicans isolates from patients with vaginal infections. 7 isolates were obtained from women with vaginal infection which were collected from various medical centers of Tehran in 2011 and 2012، using classic as well molecular techniques was identified and selected for our study. First، DNA was extracted and Multiplex PCR was performed using specific primers. The results indicated the presence of two genes als1 and hwp1 with the frequency of 57% and 28% in the strains، respectively. This study has shown that 50% of the isolates with als1 gene have hwp1 gene. It seems the presence of two genes als1 and hwp1 is an important factor in causing infection.

    Keywords: Candida albicans, biofilm, vaginal infection, Multiplex PCR
  • Reza Talebi, Ahmad Ahmadi, Fazllollah Afraz, Seyed Ziaedin Mirhosini Pages 3386-3399
    In current article، we consider this fact that camel has low susceptibility than hypertension and strong resistance to environmental toxicity. So we have done a comparison between camel and human in some families of CytP-450 genes، whichever of these particular features are correlated with each other’s. The sequences of genes are obtained of GenBank. The bioinformatics analyses have done with Laser gene، Bio edit، Mega and BlastP. The multiple alignments were revealed Thr، Pro and Phe that these are conserved entirely in the all isoforms. The most frequencies of amino acids with consensus sequences belonged to Pro، Gly and Phe. The differentiation of amino acid between similar isoforms of human and camel was observed evidently. This is probably due to mutation of genes for instance the CYP2W1 of human Ala، Val and Ser were substituted by Val، Leu and Thr in the CYP2W1 of camel respectively. We calculated the isoelectric pH of isoforms in camel were most (9. 6 for CYP2E1) and in human were least (8. 1 for CYP2E1). Tree diagram of phylogeny is based on maximum likelihood that it has revealed some isoforms of camel and human gene; these are located in the same sub clusters (CYP2C9، CYP2W1 and CYP1A1 for human with CYP2C92، CYP2W1 and CYP1A1 for camel respectively). The sequence homology and E-value had indicated. That is the maximum homology (83%) had belonged to CYP2W1 between camel and human. So we calculated the sequence homology of CYP2E1 between camel and cow (76%) was more than sequence homology in camel and human (68%). Meanwhile the cow genome was covered entirely with CYP2E1 than camel. Eventually، we consider the production of synthetic drugs and influential mutation is based on polypeptides structures of camel CYPs. These factors had known as increase of human resistance against of hypertension and environmental toxicity.
    Keywords: Hypertension, Cytochrome P, 450, Conserved sequence, Consensus sequence, Sequence Homology
  • Maryam Jamshidifar, Sayyed Hamid Zarkesh Esfahani, Kamran Ghaedi Pages 3400-3409
    Antibodies are powerful tools to study the function، localization، and interaction of proteins. These molecules are also widely used for diagnostic and therapeutic purposes. Antibodies are usually conjugated to fluorescent molecules for research and diagnostic purposes. If these fluorescent molecules are conjugated to a recombinant fluorescent protein، the combination is known as the fluobody. In this study، an anti-human CD4 single-chain variable fragment antibody fused to a green fluorescent protein was extracted from pAB1 plasmid with two restriction enzyme EcoRI and NcoI. Then، the fragment was cloned into pET26b plasmid in order to increase its expression، and the recombinant plasmid was then transformed into Escherichia coli. Insertion of this fragment into pET26b plasmid was confirmed by colony PCR and double digestion. Also، the expression of fluobody was confirmed by dot blotting. The expressed recombinant floubody is a bifunctional antibody which retains both antigen binding activity and its fluorescence simultaneously. Selection of an appropriate plasmid such as pET26b for high production of fluobody seems to be essential in order to obtain high levels of the protein.
    Keywords: Antibody, Fluorescent, Plasmid, Protein, Escherichia coli
  • Muna Kholghi, Jalal Rostamzadeh, Farid Heydari, Mohammed Razmkabir Page 3410
    Molecular subjects have an extending importance in biological investigations which their first step is nucleic acids extraction (DNA and RNA); in this case always a need for a rapid، safe and reasonable method for DNA extraction with a desirable quality and quantity is felt. In order to minimize the extraction steps، several different methods have been reported. The results of recent studies demonstrated that desirable extraction method should be selected based on its aim and function. Objective of this study was to compare the quality of quality and quantity of obtained DNA from salting out and phenol–chloroform methods. 80 sperm samples of Holstein bull were used in the trial. After DNA extraction، the spectrophotometer and agarose gel methods were used in order to determine the quality and quantity of extracted DNA. Least square means of quantity and quality of DNA in salting out method were 813. 27±114. 88 (ng/µl) and 1. 86±0. 013 respectively; and also were 175. 31±23. 16 (ng/µl) and 1. 57±0. 022 respectively in phenol – chloroform method. Electrophoresis results show that there was not any fraction in DNA samples. This study clarifies that DNA extraction using salting out method is more desirable than phenol – chloroform method; so it suggest that salting out method is more appropriate way for DNA extraction in molecular labs.
  • Neda Khazeni Oskoui, Atefeh Esmailnejad, Gholameza Nikbakht Brujen, Behrooz Asadi Pages 3420-3427

    Studies in molecular genetics are having a great influence on our knowledge regarding the genetic analysis of the populations، phylogenetic relationships، and evolution and ecology of organisms. The use of the egg as a source of genetic material is a non-invasive sampling method that is applicable in a wide range of oviparous species. The aim of this study was to present an efficient method for extracting maternal (from egg shell) and offspring (from blastoderm) DNA from a single egg. One hundred and fifty specimens from Leghorn population (including 70 eggshells، 70 blastoderms، and 10 blood samples) were analyzed. The success of the DNA extraction was investigated using the LEI0258 microsatellite marker. This microsatellite is used for MHC genotyping. Furthermore، maternal and egg shell DNA correspondence was investigated by comparing the genotypes obtained from eggshells and blood samples. Offspring and maternal DNA was successfully extracted from all blastoderms and 78% of eggshells، respectively. We were able to obtain both offspring and maternal DNA from a single egg until 3 days of incubation but after that، the embryo’s DNA contaminated the maternal DNA present in the shell. Our results showed that the single-egg method could be successfully used for maternal and offspring DNA extraction in chicken.

    Keywords: DNA Extraction, Maternal, Offspring DNA, Egg Shell, Blastoderm
  • Mojahed Kamalizadeh, Mohamadreza Bihamta, Syed Ali Peyghambari, Javad Hadian Pages 3428-3437
    In order to study the effect of titanium dioxide (TiO2) nanoparticle spraying on the expression of three genes RAS، PAL and TAT involved in the biosynthesis of rosmarinic acid in Dragonhead، this nanoparticle was sprayed on the plants at the initial flowering stage at different concentrations (0، 10، 20، 30 and 50 ppm) in a completely randomized design with three replications. Plant seeds were cultivated in a greenhouse under controlled conditions. The experiment was carried out at University College of Agriculture، Tehran University. Twenty-four hours after treatment، leaf samples were taken from the different treated and control plants in three biological replicates at complete flowering stage، and kept at -80° C for further analysis. The samples were dried in the shade for a week for extraction. High-performance liquid chromatography was used for determination of rosmarinic acid. The results showed a significant increase in the amount of rosmarinic acid when compared to the controls by which the content increased to 16. 78 mg/g extraction in concentration of 30ppm nanoparticle. The results of the expression pattern of the genes by qRT-PCR revealed that both RAS and PAL showed a similar behavior in all treatments although RAS was expressed more. TAT did not show a known pattern. It is noticeable that 30ppm nanoparticle was effective for gene expression and also to elevate the rate of rosmarinic acid biosynthesis.
    Keywords: Gene Expression, Nanoparticles, Titanium Dioxide, Rosmarinic Acid, Dragonhead
  • Samira Negahdari, Azam Rasti, Mohamadreza Dehghani, Alimohamad Froughmand, Fateme Montazeri, Hamidreza Ghadimi Pages 3438-3448

    X-chromosome inactivation (XCI) is an epigenetic strategy through wich one X chromosome in mammalian female cells is silenced to balances X-linked gene quantity between male and female. Inactivation of the similar X is preserved during somatic cell divisions، resulting in mosaic females with cell populations incloudings one or the thesecond X active. The procedure is usually random such that approximately equal quantities of cells express each X chromosome. Cellular mosaicism prepares females with a noteworthy biological advantage. As a consequence of the variety of our genomes، if a mutation be present on the maternal X chromosome، then the paternal X chromosome is unlikely to also involve that. Therefore heterozygout female، due to X inactivation، only half the cells will represent this mutation. In contrast، males with identical mutation on their maternal X chromosome represent this mutation in 100% of their cells، because they only have the X chromosome from their mother. In the general population X inactivation pattern is normally dispersed; 10–20% of females have a skewed XCI model >80:20%. X-linked genes may play a role in higher sex ratio through uncommon skewing of XCI. X chromosome skewness has been reported in female carriers of neurological disorders such as X-linked mental retardation، adrenoleukodystrophy، autism and Rett syndrome. We focused here on recent comprehension of X chromosome skewness role in neurodevelopmental disorderand how Such conceptions will give guidance for different therapy.

    Keywords: X chromosome inactivation, skewness, autism, Rett syndrome, neurodevelopmental
  • Mohammad Amin Honardoost, Hamzeh Mesrian Tanha, Masoud Etemadifari, Soheila Rahgozar, Mansoor Salehi, Kamran Ghaedi Pages 3448-3469
    Multiple sclerosis is a chronic inflammatory and myelin destructive disease which involves the central nervous system (the brain and spinal cord). miRNAs are a new group of non-coding and small RNA molecules which control post-transcriptional gene expression. By now، the role of miRNAs in several important biological processes has been emerged including growth، cell cycle، development، differentiation، metabolism، and apoptosis. miRNA Expression profiling studies show that the expression of some miRNAs (such as miR-155 and miR-326) changes in the blood cells or brain lesions of multiple sclerosis patients in comparison with healthy subjects. Furthermore، it has been reported that deficiency of these miRNAs in animal models of multiple sclerosis can change the clinical symptoms of the disease. In this review article، we first explained the mechanism of biogenesis and function of miRNAs briefly and then review the most recent studies on miRNA expression profiling in multiple sclerosis patients، the possible targets of disregulated miRNAs and the possible ways through which they could participate in the pathogenesis of multiple sclerosis.
    Keywords: Multiple Sclerosis, MicroRNAs, Gene Expression Profiling, Immune System, Autoimmune Diseases
  • Sajedeh Saedi, Mohammad Ali Jalalifar, Mohammad Pedram, Najmaldin Saki Page 3470
    Sickle cell anemia is an autosomal recessive hereditary disease، which results from the substitution of glutamic acid with valine in codon 6 of the β chain of hemoglobin that causes the RBC deformity. Five different mutations in βs haplotypes have been shown that include: Benin، Senegal، Bantu، Cameroon and Arab-Indian. A close relationship between the incidences of HbS and malaria endemic areas has been found. It has been estimated that the prevalence of sickle cell trait and sickle anemia in southern Iran are about 1. 43 and 0. 1 %، respectively. The incidence of SCD in the center of Iran is 8%. Most prevalent area was in the south of Iran (Ahwaz) and Arab-Indian haplotype are the most haplotype. Co-inheritance of α-thalassemia and HbS cause in reducing the accumulation of HbS in RBC and hemolytic anemia does not occur. South-central Iran (Kerman) the co-incidence of α-thalassemia and HbS is about 57. 5%.
    Keywords: anemia, sickle cell, haplotypes, prevalence, association with other diseases, Iran
  • Ali Hosseini Bereshneh, Ariane Sadr-Nabavi Pages 3478-3487

    Genetic diseases have caused lots of mortality and morbidity so far. In recent decades، with the completion of the Human Genome Project، a great part of genome data has been collected and the diagnosis and treatment of some genetic diseases has become available. The progress of the science of medical genetics will cause some problems and ethical questions whose answers will challenge the future of the mankind. This literature review will discuss genetic diagnosis of the diseases، ethical issures، probable challenges، and their solution using remarkable medical genetic references without bias and prejudgment. The experts of medical genetics have developed a set of criteria for ethical issues. These rules have made a functional and behavioral pattern in genetic consultation، diagnosis، treatment، and management of genetic diseases. The most important principles are the patient’s priorities، benefit، autonomy، informed choice، informed agreement، confidentiality، and justice. Ignoring or deviating from any of these principles will harm the patients. Some examples are prenatal diagnosis and ethical difficulties، legal abortion، involvement of other family members، insurance، screening of genetic diseases، and social laws. The way these problems are addressed in the contex of medical genetics ethics depends on the cultural، social، and religious characteristics of different societies. The members of the medical genetic society play a key role in balancing the needs of the patients and their families and can help to increase the safety of genetic tests and confidentiality of patient information through teamwork with related sciences.

    Keywords: Ethics, Diagnosis, Medicine, Genetics